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Universitätsbibliothek Heidelberg
Status: Bibliographieeintrag

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 Online-Ressource
Verfasst von:Knipping, Friederike [VerfasserIn]   i
 Petri, Karl [VerfasserIn]   i
 Glimm, Hanno [VerfasserIn]   i
 Kalle, Christof von [VerfasserIn]   i
 Schmidt, Manfred [VerfasserIn]   i
 Gabriel, Richard [VerfasserIn]   i
Titel:Genome-wide specificity of highly efficient TALENs and CRISPR/Cas9 for T cell receptor modification
Verf.angabe:Friederike Knipping, Mark J. Osborn, Karl Petri, Jakub Tolar, Hanno Glimm, Christof von Kalle, Manfred Schmidt, and Richard Gabriel
E-Jahr:2017
Jahr:12 February 2017
Umfang:12 S.
Fussnoten:Available online 12 February 2017 ; Gesehen am 04.09.2018
Titel Quelle:Enthalten in: Molecular therapy. Methods & clinical development
Ort Quelle:New York, NY : Nature Publishing Group, 2014
Jahr Quelle:2017
Band/Heft Quelle:4(2017), Seite 213-224
ISSN Quelle:2329-0501
Abstract:In T cells with transgenic high-avidity T cell receptors (TCRs), endogenous and transferred TCR chains compete for surface expression and may pair inappropriately, potentially causing autoimmunity. To knock out endogenous TCR expression, we assembled 12 transcription activator-like effector nucleases (TALENs) and five guide RNAs (gRNAs) from the clustered regularly interspaced short palindromic repeats (CRISPR)/CRISPR-associated (Cas9) system. Using TALEN mRNA, TCR knockout was successful in up to 81% of T cells. Additionally, we were able to verify targeted gene addition of a GFP gene by homology-directed repair at the TALEN target site, using a donor suitable for replacement of the reporter transgene with therapeutic TCR chains. Remarkably, analysis of TALEN and CRISPR/Cas9 specificity using integrase-defective lentiviral vector capture revealed only one off-target site for one of the gRNAs and three off-target sites for both of the TALENs, indicating a high level of specificity. Collectively, our work shows highly efficient and specific nucleases for T cell engineering.
DOI:doi:10.1016/j.omtm.2017.01.005
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kostenfrei: Volltext: http://dx.doi.org/10.1016/j.omtm.2017.01.005
 kostenfrei: Volltext: https://www.ncbi.nlm.nih.gov/pmc/articles/PMC5363317/
 DOI: https://doi.org/10.1016/j.omtm.2017.01.005
Datenträger:Online-Ressource
Sprache:eng
K10plus-PPN:1580672590
Verknüpfungen:→ Zeitschrift

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