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Universitätsbibliothek Heidelberg
Status: Bibliographieeintrag

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 Online-Ressource
Verfasst von:Best, Marcel [VerfasserIn]   i
 Degen, Anna [VerfasserIn]   i
 Baalmann, Mathis [VerfasserIn]   i
 Schmidt, Tobias Thomas [VerfasserIn]   i
 Wombacher, Richard [VerfasserIn]   i
Titel:Two-step protein labeling by using lipoic acid ligase with norbornene substrates and subsequent inverse-electron demand Diels-Alder reaction
Verf.angabe:Marcel Best, Anna Degen, Mathis Baalmann, Tobias T. Schmidt, and Richard Wombacher
E-Jahr:2015
Jahr:May 5, 2015
Umfang:5 S.
Fussnoten:Gesehen am 22.05.2020
Titel Quelle:Enthalten in: ChemBioChem
Ort Quelle:Weinheim : Wiley-VCH, 2000
Jahr Quelle:2015
Band/Heft Quelle:16(2015), 8, Seite 1158-1162
ISSN Quelle:1439-7633
Abstract:Abstract Inverse-electron-demand Diels?Alder cycloaddition (DAinv) between strained alkenes and tetrazines is a highly bio-orthogonal reaction that has been applied in the specific labeling of biomolecules. In this work we present a two-step labeling protocol for the site-specific labeling of proteins based on attachment of a highly stable norbornene derivative to a specific peptide sequence by using a mutant of the enzyme lipoic acid ligase A (LplAW37V), followed by the covalent attachment of tetrazine-modified fluorophores to the norbornene moiety through the bio-orthogonal DAinv?. We investigated 15 different norbornene derivatives for their selective enzymatic attachment to a 13-residue lipoic acid acceptor peptide (LAP) by using a standardized HPLC protocol. Finally, we used this two-step labeling strategy to label proteins in cell lysates in a site-specific manner and performed cell-surface labeling on living cells.
DOI:doi:10.1002/cbic.201500042
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Volltext ; Verlag: https://doi.org/10.1002/cbic.201500042
 Volltext: https://chemistry-europe.onlinelibrary.wiley.com/doi/full/10.1002/cbic.201500042
 DOI: https://doi.org/10.1002/cbic.201500042
Datenträger:Online-Ressource
Sprache:eng
Sach-SW:fluorescent probes
 inverse-electron-demand Diels-Alder cycloaddition
 ligases
 protein labeling
 tetrazines
K10plus-PPN:1698696515
Verknüpfungen:→ Zeitschrift

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